HT-MSI+ Multiplex Master Mix
Human Target – Microsatellite Instability Plus
Kit multiplex para detecção de MSI por análise de fragmento
| Catálogo Nº | Apresentação | Preço (R$) | Comprar |
|---|---|---|---|
| PCK-400XS | 50 reações | 4.156,74 | Adicionar ao Carrinho |
| PCK-400S | 100 reações | 7.482,20 | Adicionar ao Carrinho |
| PCK-400M | 200 reações | 13.467,93 | Adicionar ao Carrinho |
| PCK-400L | 500 reações | 30.303,74 | Adicionar ao Carrinho |
Eletroferogramas de duas amostras de DNA representando a distribuição de tamanho de fragmentos de 6 marcadores mononucleotídicos NR-27, NR-21, NR-24, BAT-25, BAT-26 e HSP110.
Para uso exclusivo em pesquisa
Envio: Transportado em gelo reciclável 2 - 8 °C
Condições de armazenamento: Armazene a -20 °C
armazenar em ambiente escuro e evitar ciclos de congelamento e descongelamento
Validade: 12 meses
Forma: Líquida
Descrição:
O HT-MSI+ foi desenvolvido para a detecção da instabilidade de microssatélite (MSI) por meio da metodologia de PCR multiplex fluorescente seguido da separação de fragmentos por eletroforese capilar.
O kit foi otimizado para utilização em amostras de DNA de células tumorais provindas tanto de tecido fresco (ex. sangue), congelado, ou como de tecido fixado em formol e incluído em parafina (FFPE).
O teste analisa um painel expandido de 6 mononucleotídeos quasimonomórficos, que inclui as cinco repetições de mononucleotídeos NR-27, NR-21, NR-24, BAT-25, BAT-26 padrão (Goel et al., 2010) mais o microssatélite HPS110 (repetição T17 do íntron 8), cuja mutação foi altamente associada a cânceres colorretais positivos para MSI (Dorard et al., 2011). Esses marcadores foram especialmente selecionados por suas características de alta especificidade e sensibilidade em amostras MSI positivas.
O marcador HSP110 complementa o painel possibilitando uma melhor definição de casos discordantes nas amostras que contém perfis diferentes devido à deficiência no reparo de inconsistências no DNA replicado. Além disso, eles permitem a análise de MSI sem a necessidade de amostra germinativa referência por meio da determinação do intervalo de variação quasi-monomórfica (QMVR) para cada marcador (Campanella et al, 2014 e Berardinelli et al, 2018). Os 6 marcadores são amplificados em uma única reação hexaplex que utiliza uma DNA polimerase hot start de alta especificidade em uma formulação de tampão especialmente desenvolvida para amostras de origem complexa.
A separação e análise do tamanho dos fragmentos fluorescentes amplificados podem ser realizadas em qualquer sequenciador automático que possui filtros na região do azul, verde, amarelo e vermelho.
Contente:
HT-MSI+ Multiplex Master Mix (2x) (tampa roxa)
Polimerase hot start, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, tampão de reação com KCl, (NH4)2SO4, MgCl2 e agentes estabilizadores
HT-MSI+ Primer Mix Hexaplex (10x) (tubo âmbar)
Solução com 6 pares de primers em tubo âmbar
HT-MSI+ Controle Positivo PCR (tampa amarela)
Solução controle positiva para amplificação e negativa para MSI
HT-MSI+ Água Livre de Nucleases (tampa branca)
Referências selecionadas:
- Berardinelli GN, Scapulatempo-Neto C, Durães R, Antônio de Oliveira M, Guimarães D, Reis RM. Advantage of HSP110 (T17) marker inclusion for microsatellite instability (MSI) detection in colorectal cancer patients. Oncotarget. 2018 Jun 19;9(47):28691-28701.
- Campanella NC, Berardinelli GN, Scapulatempo Neto C, Viana D, Palmero EI, Pereira R, Reis RM. Optimization of a pentaplex panel for MSI analysis without control DNA in Brazilian population: correlation with ancestry markers. Eur J Hum Genet. 2014 Jul;22(7):875-80.
- Goel A, Nagasaka T, Hamelin R, Boland CR. An optimized pentaplex PCR for detecting DNA mismatch repair-deficient colorectal cancers. PLoS One. 2010 Feb 24;5(3).